کیت سنجش فلورسانس قطرات لیپیدی

 

نام محصول	گربه خیر	مشخصات
کیت سنجش فلورسانس قطرات لیپیدی	G1905-100T	100 T

 

 

قطرات لیپید اندامک‌های ذخیره‌سازی چربی در سلول‌ها هستند که می‌توانند ذخیره و هیدرولیز لیپید خنثی را در سلول‌ها تنظیم کرده و تعادل انرژی پویا را برای سلول‌ها فراهم کنند. علاوه بر این، قطرات چربی قادر به حرکت در امتداد اسکلت سلولی و تعامل با سایر اندامک ها هستند و نقش مهمی در تنظیم انتقال سیگنال دارند. تجمع غیرطبیعی قطرات چربی سلولی در چندین نوع بیماری متابولیک مانند چاقی، کبد چرب، بیماری های قلبی عروقی و حالت های پاتولوژیک رخ می دهد.

کیت سنجش فلورسانس قطرات چربی بر اساس BODIPY 493/503 است که یک کاوشگر فلورسنت چربی دوست است که می‌تواند به لیپیدهای قطبی تبدیل شود و می‌تواند برای کالیبره کردن محتوای چربی خنثی سلول‌ها و بافت‌ها استفاده شود. این کیت توسط ما بهینه‌سازی و رفع اشکال شده است. تیم تحقیق و توسعه و دارای مزایای متعددی مانند استفاده آسان، عملکرد پایدار و خوب است تکرارپذیری و غیره هر چه محتوای لیپید درون سلولی بیشتر باشد، شدت فلورسانس تولید شده قوی‌تر است که می‌توان آن را با میکروسکوپ فلورسانس و فلوسایتومتر تشخیص داد. علاوه بر این، این کیت علاوه بر این، اسید اولئیک را به عنوان القا کننده سنتز و ذخیره تری گلیسیرید فراهم می کند که می تواند برای القای کنترل مثبت استفاده شود.

 

 

کشتی با یخ خشک؛ به مدت 6 ماه در -20 درجه دور از نور نگهداری شود.

 

 

شماره کامپوننت	جزء	G1904-100T
G1905-1	پروب سنجش قطرات چربی (2 میلی مولار)	100 μL
G1905-2	بافر سنجش قطرات چربی	100 میلی لیتر
G1905-3	القا کننده مثبت (500 میلی مولار)	50 μL
دستی		1 عدد

 

توجه: زمان‌های واکنش بالا برای یک سیستم صفحه چاه 6- مورد سنجش قرار می‌گیرند.

 

 

توجه: سلول‌های چسبنده به صفحه چاه را به عنوان مثال در نظر بگیرید، سلول‌های تعلیق باید هر بار که مایع عوض می‌شود سانتریفیوژ شوند. نمونه‌های بافت مستقیماً به مراحل رنگ‌آمیزی و برچسب‌گذاری اشاره دارند و حجم کلی معرف‌های مورد استفاده با توجه به وضعیت تنظیم می‌شود. در صورت لزوم، نمونه ها را می توان از قبل ثابت کرد، اما لطفا از سوراخ شدن نمونه ها خودداری کنید.

1. تهیه محلول کاری برای سنجش قطرات چربی و محلول کاری برای القای قطرات چربی:

1.1. مقدار مناسبی از پروب سنجش قطرات چربی (2 میلی‌مولار) و بافر سنجش قطرات چربی را بگیرید، به طور کامل به نسبت 1: 500-2000 مخلوط کنید و محلول کاری برای سنجش قطرات لیپید آماده کنید.

1.2. مقدار مناسبی از القاء کننده مثبت (500 میلی مولار) را بگیرید و از محیط کشت سلولی سلول های آزمایشی مربوطه استفاده کنید تا آن را تا 400-1000 میکرومولار رقیق کنید و یک محلول القای قطرات چربی برای استفاده اضافی تهیه کنید (این غلظت مرجع است. محدوده، و می تواند به طور مناسب با توجه به ماهیت سلول ها یا شرایط دیگر تنظیم شود).

2. گروه کنترل مثبت و دارو و درمان‌های دیگر (6-سلول‌های چسبنده به صفحه چاه، به عنوان مثال، سلول‌های سوسپانسیون در هر بار تعویض مایع، لطفاً سانتریفیوژ را انجام دهید):

2.1. سلول‌ها در صورت نیاز در 6-صفحات چاهی (با یا بدون خزنده بسته به سنجش و تجهیزات) از قبل کاشته می‌شوند.

2.2. محیط کشت سلولی اصلی را بردارید و دو بار با PBS یا سایر بافرها بشویید.

2.2.1. گروه آزمایش: سلول‌های مورد آزمایش تحت تحریک دارویی یا سایر درمان‌های مرتبط قرار می‌گیرند و زمان انکوباسیون مورد نظر توسط خودتان تنظیم می‌شود.

2.2.2. گروه کنترل مثبت: 1 میلی لیتر محلول کار القای قطرات لیپیدی به صفحه چاه اضافه می شود که در یک انکوباتور برای انکوباسیون یک شبه قرار می گیرد.

2.3. در پایان انکوباسیون، برای برچسب زدن لکه به مرحله 3 بروید.

3. نشانگر رنگ آمیزی قطرات چربی:

3.1. محیط سلول زا را بردارید و 2-3 بار با PBS یا سایر بافرها بشویید.

3.2. بافر شستشو را بردارید، 1 میلی لیتر از محلول کار سنجش قطرات لیپید اضافه کنید و با تکان دادن ملایم مخلوط کنید.

3.3. به مدت 15 دقیقه در انکوباتور CO2 محافظت شده از نور انکوبه کنید.

3.4. پس از انکوباسیون، آن را دو بار با PBS یا بافرهای دیگر بشویید و می توان آن را با هسته و سایر عملیات رنگ آمیزی کرد و یا با تجهیزات مناسب با توجه به نیازهای آزمایشی تشخیص داد.

4. تشخیص قطرات چربی:

4.1. نمونه پس از انکوباسیون و شسته شده در 3.4 با استفاده از روش و ابزار دقیق مورد تجزیه و تحلیل قرار می گیرد، با برچسب نشان دادن فلورسانس سبز، EX/EM 493/503 نانومتر، و نمونه هایی از تشخیص ابزاری در زیر آورده شده است.

4.1.1. به طور مستقیم یا با محلول آب بندی خاموش کننده ضد فلورسانس (شماره مورد G1401)، فیلم مهر و موم شده و سپس برای تشخیص و آنالیز در زیر میکروسکوپ فلورسانس قرار می گیرد.

4.1.2. پس از هضم و سوسپانسیون مجدد با استفاده از تریپتیک دیجست (سلول های سوسپانسیون استفاده نمی شوند)، سلول ها با استفاده از فلوسیتومتری شناسایی و تجزیه و تحلیل می شوند.

 

 

1. با توجه به انواع و خواص مختلف سلول ها، غلظت القا کننده ها و پروب های مثبت و زمان انکوباسیون را می توان به طور مناسب با توجه به نیاز آزمایش تنظیم کرد.

2. نمونه ها باید از تماس با حلال های آلی یا سایر اجزایی که بر لیپیدها تأثیر می گذارند خودداری کنند تا از تداخل در دقت سنجش جلوگیری شود.

3. رنگ های فلورسنت در معرض خاموش شدن هستند و فرآیند باید از نور محافظت شود.

4. برای سلامت و ایمنی خود، لطفاً در حین کار از کت و دستکش آزمایشگاهی استفاده کنید.

 

فقط برای استفاده تحقیقاتی!

 

 

تگ های محبوب: کیت سنجش فلورسانس قطرات چربی، تولید کنندگان، تامین کنندگان، کارخانه کیت سنجش فلورسانس قطرات چربی چین