دی هیدرواتیدیوم

دی هیدرواتیدیوم (DHE)، یک پروب تشخیص فلورسنت رایج برای آنیون های سوپراکسید است. DHE آزادانه وارد سلول می شود و در حضور آنیون های سوپراکسید داخل سلولی هیدروژنه می شود تا اتیدیوم بروماید تولید کند. اتیدیوم بروماید به اسیدهای نوکلئیک داخل سلولی متصل می شود و فلورسانس قرمز تولید می کند. هنگامی که سطح آنیون سوپراکسید درون سلولی بالا باشد، هرچه اتیدیوم بروماید بیشتری تولید شود، شدت فلورسانس بیشتر می‌شود و بالعکس شدت فلورسانس ضعیف‌تر می‌شود. بنابراین می توان از آن برای تشخیص سطح آنیون سوپراکسید داخل سلولی استفاده کرد.

کشتی با یخ خشک؛ به مدت 6 ماه در -20 درجه دور از نور نگهداری شود.

توجه: تعداد واکنش های بالا برای یک سیستم صفحه چاه 6- مورد سنجش قرار گرفت.

1. این محصول مستربچ 5 میلی مولار دی هیدرواتیدیوم (کاوشگر فلورسنت آنیون سوپراکسید) است که با استفاده از محیط یا بافر مناسب در محلول کاری DHE (معمولاً {2}} میکرومولار برای آزمایش کافی است) رقیق می‌شود.

2. سلول های نرمال یا درمان شده را 1-2 بار با PBS یا سایر بافرها بشویید.

3. پس از برداشتن بافر شستشو، 1 میلی لیتر محلول کار DHE اضافه کنید و به مدت 30 دقیقه در انکوباتور کشت سلولی محافظت شده از نور انکوبه کنید.

4. محلول کار DHE را بردارید و 1-2 بار با PBS یا سایر بافرها بشویید.

5. تست تحت ابزار مربوطه. DHE خود فلورسانس آبی است، Ex 355 نانومتر، Em 420 نانومتر است. هنگامی که DHE هیدروژنه می شود و به اسید نوکلئیک متصل می شود، فلورسانس قرمز نشان می دهد، Ex 520 نانومتر، Em 605 نانومتر است.

1. با توجه به انواع و خواص مختلف سلول ها، غلظت کار پروب و زمان انکوباسیون را می توان به طور مناسب با توجه به نیازهای آزمایش تنظیم کرد.

2. محلول کار پروب، بافر شستشو و غیره باید از قبل گرم شده و پردازش شوند تا از تحریک اختلاف دما بر سلول ها جلوگیری شود.

3. رنگ های فلورسنت در معرض خاموش شدن هستند و فرآیند باید از نور محافظت شود.

4. دی هیدرواتیدیوم به راحتی در هوا اکسید می شود، تا حد امکان از قرار گرفتن در معرض هوا خودداری کنید، توصیه می شود در قسمت های کوچک نگهداری شود و از انجماد و ذوب مکرر خودداری شود.

5. برای سلامتی و ایمنی خود، لطفاً در حین کار از کت و دستکش آزمایشگاهی استفاده کنید.

فقط برای استفاده تحقیقاتی!

تگ های محبوب: دی هیدرواتیدیوم، تولید کنندگان، تامین کنندگان، دی هیدرواتیدیوم چین