0.25% تریپسین-EDTA (محلول در PBS)

تریپسین یک هیدرولاز سرین است که انتهای کربوکسیل باقی مانده های لیزین و آرژنین را در زنجیره های پلی پپتیدی قطع می کند. هضم تریپسین در استخراج سلول های بافتی، کشت و کشت سلولی در شرایط آزمایشگاهی برای هیدرولیز پروتئین های بین سلولی و برای تجزیه بافت ها یا سلول ها به سلول های منفرد استفاده می شود. تریپسین به طور موثر در دمای 37 درجه، pH 8 هضم می شود.{2}}. غلظت کاری معمول تریپسین 0.25% است. EDTA می تواند یون های کلسیم و منیزیم را کلات کند و استفاده از EDTA در محلول های تریپسین می تواند هیدرولیز پیوندهای بین سلولی را تسریع کند و هضم را تقویت کند.

این محصول حاوی {0}}.25% تریپسین با 0}.9 میلی مولار EDTA، فاقد نشانگر قرمز فنل، حلال بافر PBS است و با فیلتراسیون 0.1 میکرومتر استریل می‌شود.

کشتی با یخ مرطوب؛ ذخیره در درجه -20، اعتبار به مدت 12 ماه. از انجماد و ذوب مکرر خودداری کنید.

سلول های چسبنده

1. محیط کشت سلولی را آسپیره کنید و سلول ها را با محلول PBS، D-Hank استریل یا محیط کشت بدون سرم بشویید تا سرم باقیمانده خارج شود.

2. مقدار مناسبی از این محصول را برای پوشاندن سلول‌ها اضافه کنید و بگذارید 1-5 دقیقه در دمای اتاق برای هضم بماند.

3. در زیر میکروسکوپ، زمانی که سلول‌ها انقباض آشکار به نظر می‌رسند، دمیدن سلول‌ها با پیپت آسان‌تر است. محلول هضم سلولی تریپسین را آسپیره کنید، محیط کشت سلولی حاوی سرم را اضافه کنید و به آرامی سلول‌ها را باد کنید تا سوسپانسیون سلولی ایجاد شود. می توان مستقیماً خرده فرهنگ کرد. اگر هنگام دمیدن به آرامی با اپیپت، برداشتن سلول‌ها از کف بشقاب دشوار است که نشان‌دهنده زمان ناکافی هضم است، با افزودن محلول هضم سلولی تریپسین، دوباره هضم کنید. بیش از حد هضم نکنید.

1. با توجه به خواص مختلف بافت ها یا سلول ها، آزمایشگر باید زمان هضم بهینه را با توجه به موقعیت خاص تعیین کند. زمان هضم نباید زیاد باشد، در غیر این صورت چسبندگی و رشد سلولی تحت تاثیر قرار می گیرد.

2. این محصول حاوی عامل باکتریواستاتیک نیست. برای جلوگیری از آلودگی شیره های گوارشی توسط میکروارگانیسم ها باید توجه ویژه ای به عملیات اسپتیک در حین استفاده شود.

3. این محصول نباید به مدت طولانی در دمای 4 درجه نگهداری شود، از انجماد و ذوب مکرر خودداری کنید. پیشنهاد می شود به قسمت های کوچک تقسیم شده و در درجه -20 نگهداری شود.

4. برای انتخاب EDTA و فنل قرمز در تریپسین، محلول هضم تریپسین حاوی EDTA را می توان با توجه به نیازهای تجربی برای سلول های تومور عمومی انتخاب کرد. برای سلول های حساس تر و آسیب پذیرتر، مانند سلول های اولیه و سلول های به راحتی قابل هضم، محلول هضم تریپسین بدون EDTA را انتخاب کنید. اگر سلول ها حساسیت خاصی دارند، محلول هضم تریپسین با غلظت تریپسین کمتر را انتخاب کنید. برای تشخیص آپوپتوز توسط فلوسیتومتری، باید از محلول هضم تریپسین بدون EDTA استفاده شود.

5. برای ایمنی و سلامت خود، لطفا از عینک ایمنی، دستکش یا لباس محافظ استفاده کنید.

فقط برای استفاده تحقیقاتی!

تگ های محبوب: {{0}}.25% تریپسین-ادتا (محلول در سرب)، چین 0.25% تریپسین-ادتا (محلول در سرب) تولید کنندگان، تامین کنندگان، کارخانه