مایع رنگ آمیزی پراکسید هیدروژن گیاهی (DAB)

بافت های گیاهی انواع گونه های اکسیژن فعال (ROS) را در شرایط تنش تولید می کنند. فعالیت ROS بسیار بزرگ و بسیار ناپایدار است، بنابراین تشخیص ROS معمولاً به محصولات نهایی آن بستگی دارد. پراکسید هیدروژن نوعی از گونه های اکسیژن فعال است. پراکسید هیدروژن که توسط کاتالاز کاتالیز می‌شود، می‌تواند به سرعت با DAB (3، 3-دی‌آمینوبنزیدین تتراهیدروکلراید) واکنش داده و یک ترکیب قهوه‌ای-قرمز تشکیل دهد تا پراکسید هیدروژن را در بافت‌ها قرار دهد. بر اساس اصل اساسی به آن روش DAB نیز می گویند. بر اساس اصل فوق، از این محصول برای رنگ آمیزی پراکسید هیدروژن در بافت های زنده گیاهان استفاده می شود. به طور کلی روی نوک ریشه حساس، برگ ها و سایر رنگ آمیزی های کلی اعمال می شود، پس از رنگ آمیزی محل تجمع پراکسید هیدروژن قهوه ای تا قهوه ای تیره است.

حمل و نقل یخ مرطوب؛ ذخیره در درجه 2-8، اعتبار به مدت 12 ماه.

1. آماده سازی معرف: 100 میلی گرم DAB به طور کامل در 100 میلی لیتر بافر فسفات حل شد تا محلول کار رنگ آمیزی DAB به دست آید که در دمای 4 درجه زیر نور نگهداری شد و در مدت یک هفته موثر بود. توجه: DAB به نور حساس است و در طول فرآیند انحلال باید از نور محافظت شود. اگر انحلال آن دشوار است، انحلال را می توان با هم زدن اولتراسونیک و مغناطیسی تقویت کرد.

2. نهال ها یا نوک ریشه گیاهان را تحت تنش (مانند فلزات سنگین) جمع آوری کنید، کمی با آب خالص بشویید و روی کاغذ صافی بگذارید تا آب اضافی آن خارج شود. نهال‌ها یا نوک ریشه گیاه در محلول رنگ کاری رنگ‌آمیزی DAB در دمای اتاق غوطه‌ور شدند و به مدت 2-6 ساعت دور از نور قرار گرفتند تا زمانی که قسمت مثبت قهوه‌ای تیره شود و بقیه قسمت‌ها تقریباً بی‌رنگ یا رنگ گیاه را نشان داد. خود (زمان رنگرزی را با توجه به میزان جوانی و رشد رنگ گیاهان تنظیم کنید)

3. نهال ها یا برگ های گیاه را با احتیاط با موچین جدا کنید و در آب خالص فرو کنید و 3-5 بار به صورت رفت و برگشت آبکشی کنید و روی کاغذ صافی بگذارید تا آب اضافی آن گرفته شود و سپس در اتانول 95 درصد فرو کنید. در 40 درجه برای 3-16 ساعت. هدف از بین بردن کلروفیل نهال ها یا خود برگ های گیاه است و اتانول 95 درصد تازه را می توان چندین بار در طول رنگ زدایی جایگزین کرد.

4. نهال ها یا برگ ها را با موچین بیرون آورید، آنها را در آب خالص غوطه ور کنید و 3-5 بار به جلو و عقب بشویید، آنها را روی کاغذ صافی قرار دهید تا آب اضافی آن گرفته شود، نمونه ها را به مقدار مناسبی از نمونه DAB منتقل کنید. محلول نگهدارنده و آنها را به مدت 30 دقیقه خیس کنید، سپس عکس بگیرید. نمونه ها را می توان به مدت یک هفته در محلول در دمای اتاق نگهداری کرد.

1. پس از تهیه محلول کار رنگ آمیزی DAB باید در دمای 4 درجه و دور از نور نگهداری شود و ظرف یک هفته استفاده شود. زمان ذخیره سازی خیلی طولانی است، روی رنگ تأثیر می گذارد.

2. از آنجایی که پراکسید هیدروژن به راحتی تجزیه می شود و هر عامل خارجی ممکن است تنش گیاه را برای تولید پراکسید هیدروژن تحریک کند، نمونه های گیاه باید در اسرع وقت تازه جمع آوری شده و رنگ آمیزی شوند. گروه شاهد مثبت و منفی توصیه می شود.

3. برای ذخیره نتایج پس از رنگ آمیزی نمونه، در اسرع وقت عکس بگیرید.

4. در حین کار از کت آزمایشگاه و دستکش یکبار مصرف استفاده کنید.

فقط برای استفاده تحقیقاتی!

تگ های محبوب: مایع رنگ آمیزی پراکسید هیدروژن گیاهی (داب)، تولید کنندگان، تامین کنندگان، مایع رنگ آمیزی پراکسید هیدروژن گیاهی (داب) چین