کیت استخراج DNA بدون سرم/پلاسما

این کیت از جذب برگشت پذیر اسیدهای نوکلئیک توسط ستون جذب، همراه با یک سیستم بافر منحصر به فرد استفاده می کند، می تواند قطعات کوچکتر DNA ({0}} bp) را به طور موثر متصل کند و اتصال قطعات بزرگتر مانند DNA ژنومی را به حداقل برساند. این محصول می تواند به سرعت و به طور قابل اعتماد DNA آزاد را از مقدار کمی مایعات بدن بدون سلول مانند سرم، پلاسما و ادرار جدا کند و محصولات جدا شده را می توان برای تکثیر PCR، توالی یابی و ژنوتیپ و سایر آزمایشات مربوط به پایین دست استفاده کرد.

پروتئیناز K و RNA حامل همراه با یخ مرطوب ارسال شده و در درجه -20 ذخیره می‌شوند. سایر معرف ها حمل و در دمای اتاق ذخیره شدند. تا 12 ماه اعتبار دارد.

قبل از شروع (لطفا با دقت مطالعه کنید).

1. اگر بافر CBL رسوب کرد، لطفاً در دمای 37 درجه حرارت دهید تا حل شود و پس از بازگشت به دمای اتاق از آن استفاده کنید.

2. لطفاً 17 میلی لیتر اتانول بی آب به بافر CPD و 56 میلی لیتر اتانول بی آب به بافر CPW اضافه کنید، قبل از اولین استفاده آن را کاملاً مخلوط کنید.

1. 200 میکرولیتر سرم، پلاسما، ادرار و نمونه های دیگر در یک لوله سانتریفیوژ 1.5 میلی لیتری گرفته شد، اگر حجم نمونه کمتر از 200 میکرولیتر باشد، حجم را با PBS یا آب بدون هسته به 200 میکرولیتر برسانید.

2. 20 میکرولیتر پروتئیناز K، 200 میکرولیتر بافر CBL، و 1 میکرولیتر RNA حامل به لوله سانتریفیوژ اضافه شد و نمونه ها کاملاً مخلوط شده و در دمای 56 درجه به مدت 10 دقیقه انکوبه شدند. نمونه را هر از گاهی تکان دهید.

3. 400 میکرولیتر ایزوپروپانول اضافه کنید، برعکس کنید و خوب مخلوط کنید، آن را به مدت 5 دقیقه در دمای اتاق بگذارید، سانتریفیوژ مختصر.

4. محلول مرحله قبل را به ستون چرخش DNA منتقل کنید، با سرعت 12000 دور در دقیقه به مدت 1 دقیقه سانتریفیوژ کنید و فیلتر را از لوله جمع آوری دور بریزید.

5. 500μL بافر CPD را به ستون اسپین DNA اضافه کنید (بررسی کنید که آیا قبل از استفاده اتانول بی آب اضافه شده است)، سانتریفیوژ کنید با سرعت 12،{3}} دور در دقیقه به مدت 1 دقیقه، و فیلتر را از لوله جمع آوری دور بریزید.

6. 600 میکرولیتر بافر CPW را به ستون چرخش DNA اضافه کنید (بررسی کنید که آیا اتانول بی آب قبل از استفاده اضافه شده است یا خیر)، سانتریفیوژ را با سرعت 12،{3}} دور در دقیقه به مدت 1 دقیقه، و مایع زائد را دور بریزید.

7. مرحله 6 را برای مرحله دوم شستشوی 600 میکرولیتری بافر CPW تکرار کنید.

8. ستون چرخش DNA را روی لوله Collection قرار دهید و آن را با سرعت 12، 000 دور در دقیقه به مدت 2 دقیقه سانتریفیوژ کنید.

9. ستون چرخش DNA را به یک لوله سانتریفیوژ 1.5 میلی لیتری بدون هسته جدید منتقل کنید، درب آن را باز کنید و آن را در دمای اتاق به مدت 3-5 دقیقه بگذارید تا اتانول باقی مانده از ستون چرخش DNA کاملاً تبخیر شود.

10. 30-50 میکرولیتر بافر TE یا آب بدون هسته را به مرکز ستون چرخش DNA اضافه کنید و به مدت 2-5 دقیقه در دمای اتاق بگذارید، سانتریفیوژ کنید با سرعت 12،000 دور در دقیقه به مدت 2 دقیقه برای شستشوی DNA آزاد برای افزایش بازده، اولین شوینده را نیز می توان دوباره به ستون چرخش DNA اضافه کرد، به مدت 2 دقیقه در دمای اتاق رها کرد، با سرعت 12 و {9}} دور در دقیقه به مدت 2 دقیقه سانتریفیوژ کرد و دوباره جمع آوری کرد.

1. نمونه باید از انجماد و ذوب مکرر جلوگیری کند و می‌تواند برای نگهداری طولانی مدت در درجه -80 منجمد شود.

2. لطفا قبل از استفاده دستورالعمل ها را به دقت بخوانید و به شدت دستورالعمل ها را دنبال کنید. نمونه های بالینی باید در کابینه ایمنی زیستی انجام شود. اگر نمونه های فرآوری شده حاوی ویروس های زنده بیماری زا و غیره باشد، باید با الزامات مقررات ملی ایمنی زیستی آزمایشگاهی مربوطه مطابقت داشته باشد.

فقط برای استفاده تحقیقاتی!

تگ های محبوب: کیت استخراج DNA بدون سرم / پلاسما، تولید کنندگان کیت استخراج DNA بدون سرم / پلاسما، تولید کنندگان، کارخانه