محلول غلظت اگزوزوم

اگزوزوم ها وزیکول های غشایی در مقیاس نانو با اندازه یکنواخت، با اندازه ذرات در محدوده 30 تا 150 نانومتر هستند که به طور فعال توسط سلول ها به فضای خارج سلولی ترشح می شوند. این وزیکول نشانگر زیستی خاص خود را دارد و حاوی پروتئین‌ها، mRNA، miRNA، لیپیدها و سایر مواد است که می‌توانند در فرآیند رشد سلولی، تکثیر، تمایز، مهاجرت، رگ‌زایی و رشد تومور از طریق مواد بین سلولی و ارتباط سیگنال شرکت کنند.

این محصول محلول غلیظ رایج اگزوزوم ها است که می تواند به سرعت تعداد زیادی ذرات کامل اگزوزوم را از نمونه های بیولوژیکی مایع مانند مایع رویی سلولی و سرم حیوانی بدست آورد.

حمل و نقل در دمای اتاق؛ در دمای اتاق با مدت اعتبار 12 ماه نگهداری شود.

1. پیش تصفیه نمونه:

الف) نمونه های بیولوژیکی اگزوزوم کم محتوای (با استفاده از "Cell Supernatant" به عنوان مثال): مایع رویی سلول را بگیرید، در دمای 4 درجه، 3{6}}00×g به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید تا بقایای سلولی از بین برود. مایع رویی را مجدداً در دمای 4 درجه و 10000×g به مدت 20 دقیقه سانتریفیوژ کنید. سپس مایع رویی را با استفاده از یک غشای فیلتر 0.22 میکرومتر فیلتر کنید و برای استفاده بعدی آن را خالص کنید.

ب) نمونه های بیولوژیکی اگزوزوم با محتوای بالا (با استفاده از "سرم حیوانات" به عنوان مثال): سرم حیوانی را بگیرید، سانتریفیوژ کنید در 4 درجه، 3{6}}00×g برای 10 دقیقه مشت. سپس مایع رویی را در دمای 4 درجه و 10000×g به مدت 20 دقیقه سانتریفیوژ کنید. آخرین مایع رویی را با استفاده از یک غشای فیلتر 0.22 میکرومتر فیلتر کنید. پس از خالص سازی اولیه، سرم حیوانی را به نسبت 1:9 تا 1 × حجم PBS رقیق کنید تا بعدا استفاده شود.

2. غلظت اگزوزوم:

الف) نمونه بیولوژیکی فرآوری شده را گرفته و با حجم مساوی از کنسانتره اگزوزوم مخلوط کنید. پس از نوسان گردابی شدید به مدت 15 ثانیه-60 ثانیه، اجازه دهید به مدت 2 ساعت در دمای 4 درجه در یخچال بماند (اختیاری: نوسان گرداب هر 30 دقیقه در طول دوره ثابت).

ب) محلول مخلوط را در یک سانتریفیوژ قرار دهید، سانتریفیوژ در دمای 4 درجه و 10000×g به مدت 60 دقیقه. مایع رویی را دور بریزید.

ج) بافر PBS از قبل سرد شده را به نسبت 1 x حجم PBS=100:1 با توجه به حجم کنسانتره اگزوزوم اضافه کنید و مجدداً معلق کنید و برای بارش سانتریفیوژ کنید (توجه داشته باشید: این معادل 100× غلظت است و متفاوت است. حجم PBS را می توان در صورت نیاز برای سوسپانسیون مجدد اضافه کرد).

د) سوسپانسیون سنگین را به یک لوله سانتریفیوژ 1.5 میلی لیتری منتقل کرده و در سانتریفیوژ قرار دهید. سانتریفیوژ در 4 درجه و 12000 دور در دقیقه به مدت 5 دقیقه. مایع رویی را جمع آوری کنید.

ه) مایع رویی غنی از اگزوزوم است و می تواند برای آزمایش های بعدی استفاده شود. همچنین می توان آن را در درجه -80 برای استفاده در آینده بسته بندی و ذخیره کرد.

1. این محصول را می توان به طور پایدار در دمای اتاق برای مدت طولانی نگهداری کرد. لطفا قبل از استفاده تکان دهید و خوب مخلوط کنید.

2. این محصول را می توان به عنوان مکمل غلظت رویی سلول در ستون کروماتوگرافی جداسازی اگزوزوم G4113 (روی سلول) استفاده کرد.

3. در طول آزمایش، لطفاً برای جلوگیری از آلودگی و اطمینان از ایمنی، لباس آزمایشگاه و دستکش یکبار مصرف بپوشید.

فقط برای استفاده تحقیقاتی!

تگ های محبوب: محلول غلظت اگزوزوم، تولید کنندگان محلول غلظت اگزوزوم چین، تامین کنندگان، کارخانه