محلول نوترکیب تریپسین-EDTA Swe بدون فنل قرمز

تریپسین یک هیدرولاز سرین است که می تواند انتهای کربوکسیل لیزین و آرژنین را در زنجیره های پلی پپتیدی قطع کند. هضم تریپسین در استخراج سلول های بافتی، کشت و کشت سلولی در شرایط آزمایشگاهی برای هیدرولیز پروتئین های بین سلولی و تجزیه بافت ها یا سلول ها به سلول های منفرد استفاده می شود. تریپسین معمولی از پانکراس حیواناتی مانند خوک و گاو به دست می آید. منشاء آنزیم های معمولی پانکراس و ویژگی های فرآیند تولید به این معنی است که آنها ناگزیر حاوی ناخالصی هایی با منشاء حیوانی و آلودگی ویروسی بالقوه هستند. این محصول از تریپسین نوترکیب خوک برای جایگزینی تریپسین معمولی استفاده می کند. هیچ ماده خام مشتق شده از حیوان در فرآیند تولید استفاده نمی شود و خلوص و زنده بودن تریپسین خوک نوترکیب از طریق چندین دور تصفیه تضمین می شود. این به آن اجازه می دهد تا نه تنها عملکرد تریپسین معمولی را جایگزین کند، بلکه می تواند برای هضم سلول ها یا بافت های ویژه ای که منشا عاری از حیوانات به شدت مورد نیاز است، استفاده شود. علاوه بر این، محصول حاوی EDTA، فاقد نشانگرهای قرمز فنل است.

کشتی با یخ مرطوب؛ به مدت 12 ماه در دمای 4 درجه دور از نور نگهداری شود. اگر محصول برای مدت کوتاهی استفاده نمی شود، توصیه می شود برای مدت طولانی تری در درجه -20 نگهداری شود.

توجه: پروتکل‌های زیر عمدتاً برای سلول‌های چسبنده استفاده می‌شوند. برای هضم بافت، ابتدا بافت باید به اندازه های مناسب بریده شود. زمان لازم برای هضم از بافتی به بافت دیگر بسیار متفاوت است و معمولاً توصیه می شود که بافت ها پس از هضم به اندازه کافی تجزیه شوند.

1. محیط کشت سلولی اصلی را بردارید و سلولها را 1-2 بار با PBS، محیط بدون سرم یا سایر بافرها بشویید تا سرم باقیمانده حذف شود.

2. مقدار مناسب محلول هضم تریپسین نوترکیب را اضافه کنید تا سلولها را بپوشاند و زیر میکروسکوپ هضم شود تا زمان هضم اکثر سلولها بین 30 ثانیه-3 دقیقه باشد. برای سلول های غیرقابل هضم، می توان آن را در انکوباتور کشت سلولی قرار داد تا برای مدت معینی هضم شود (زمان هضم فقط برای مرجع است، زمان هضم خاص باید با توجه به وضعیت واقعی تعیین شود).

3. هنگامی که سلول ها انقباض یا تغییرات مورفولوژیکی قابل توجهی نشان می دهند، هضم تریپسین بازسازی شده را آسپیره کنید و مقدار مناسبی از محیط کشت سلولی حاوی سرم را اضافه کنید تا هضم خاتمه یابد (اگر جدا شدن سلول ها از ته بشقاب در هنگام دمیدن به آرامی دشوار است. یک پیپتور، این نشان می دهد که زمان هضم کافی نیست و می توان هضم را با افزودن سلول تریپسین از سر گرفت. هضم. اجتناب از هضم بیش از حد).

4. سوسپانسیون سلولی را در یک لوله سانتریفیوژ جمع آوری کنید، با سرعت 800-1200 دور در دقیقه به مدت 3-5 دقیقه سانتریفیوژ کنید، مقدار مناسبی از محیط کشت سلولی حاوی سرم (اختیاری) اضافه کنید.

5. سلول ها را به آرامی باد کنید تا سوسپانسیون سلولی بسازید که می توان از آن برای عبور یا آزمایش های بعدی استفاده کرد.

1. این محصول را می توان به طور مستقیم برای هضم سلولی در 4 درجه استفاده کرد. دمای هضم را می توان در دمای اتاق یا در انکوباتور در صورت نیاز انتخاب کرد، اما لطفاً محصول را مستقیماً در دمای 37 درجه گرم نکنید. افزایش و کاهش مکرر دما تأثیر خاصی بر فعالیت آنزیم دارد.

2. پس از دریافت محصول را می توان در بخش های مورد نیاز ذخیره کرد. در صورت نیاز به نگهداری در-20 درجه، از انجماد و ذوب مکرر خودداری کنید.

3. زمان هضم بین خطوط سلولی یا بافت متفاوت است، بنابراین لطفاً زمان هضم بهینه را بررسی کنید تا از هضم بیش از حد طولانی مدت جلوگیری کنید، که ممکن است بر فعالیت و وضعیت سلول تأثیر بگذارد.

4. این محصول آسپتیک و قابل استفاده است و از نظر مایکوپلاسما و اندوتوکسین آزمایش شده است. لطفا در هنگام استفاده به عملکرد آسپتیک توجه کنید.

5. به خاطر سلامت و ایمنی خود، لطفاً هنگام عمل از کت و دستکش آزمایشگاهی استفاده کنید.

فقط برای استفاده تحقیقاتی!

تگ های محبوب: محلول تریپسین-ادتا نوترکیب swe بدون فنل قرمز، محلول تریپسین-ادتا نوترکیب چین بدون فنل قرمز تولید کنندگان، تامین کنندگان، کارخانه